Posiew redukcyjny wykonuje się na podłożu
agarowym na płytkach Petriego.
|
Julius Petri
był współpracownikiem Roberta Kocha. W 1887 roku
wynalazł to proste naczynie do hodowli bakterii, stosujemy je do dziś (na
rysunku dolna część płytki Petriego). |
|
Posiew redukcyjny umożliwia uzyskanie czystej
kultury bakterii, na prawidłowo posianej płytce po całonocnej inkubacji
można zaobserwować pojedyncze
kolonie bakterii. Każda kolonia to potomstwo jednej bakterii, aby była widoczna
gołym okiem, kolonia bakteryjna musi zawierać około 107 komórek.
Posiew redukcyjny zwykle stosuje się do
przesiewania bakterii z podłóż stałych.
|
|
Należy pamiętać, że każdorazowo przed
rozsianiem materiału opalamy ezę w płomieniu palnika!!! Materiał
mikrobiologiczny nanosimy tylko raz, później jedynie go rozprowadzamy
jałową ezą po całej powierzchni płytki. |
Na płytkę z agarem należy nanieść 0,1 ml
płynnej hodowli bakterii. Zawiesinę rozetrzeć jałową głaszczką po całej
powierzchni podłoża. W ten sposób po całonocnej inkubacji uzyskujemy murawę
bakterii.
Posiew murawowy stosuje się
¨
do określania miana hodowli bakteryjnej – przy wysokim stopniu
rozcieńczenia hodowli (~ 10-6) uzyskuje się pojedyncze
kolonie bakteryjne
¨
oznaczania wrażliwości bakterii na chemoterapeutyki
¨
w celu uzyskania maksymalnej liczby transformantów
¨
w celu uzyskania maksymalnej liczby transduktantów
Posiew kłuty wykonuje się wkłuwając ezę w słupek
Posiew rysowy przeprowadza się na powierzchni skosu agarowego
Bakterie inkubuje się w cieplarkach. Właściwie wszystkie bakterie,
którymi zajmujemy się na ćwiczeniach należą do organizmów mezofilnych – optimum
wzrostu w temperaturze 37 oC.
Po inkubacji płytki przechowywane są
w chłodni (lodówce, temp od +4 do + 10oC).
W chłodni przechowuje się także
wszystkie jałowe pożywki mikrobiologiczne.
Ó Anna-Karina
Kaczorowska