Szereg Biochemiczny dla bakterii z rodziny Enterobacteriaceae

Szereg biochemiczny stosuje się zwykle do identyfikacji bakterii należących do tego samego rodzaju lub rodziny.

Najwygodniej jest przygotować gęstą zawiesinę bakterii z jałowo pobranej, pojedynczej kolonii. Bakterie należy zawiesić w jałowym roztworze soli fizjologicznej

Typ podłoża	Rodzaj posiewu	Badana aktywność biochemiczna	Odczyt
Podłoże Kliglera	rysowy na powierzchnię skosu i kłuty w słupek	Rozkład glukozy w warunkach tlenowych	zmiana zabarwienia części słupkowej na żółtą oznacza, że bakterie rozkładają glukozę
		Rozkład laktozy w warunkach tlenowych	zmiana zabarwienia części słupkowej i skośnej na żółtą oznacza, że bakterie rozkładają laktozę
		Wydzielanie H2S – obecność proteaz	zaczernienie podłoża świadczy o aktywności enzymów proteolitycznych
Podłoże Clarka	zawiesinę lub masę bakteryjną rozetrzeć na ściankach probówki tuż przy powierzchni do odczytu hodowlę bakterii rozdzielić do 2 probówek	Odczyn VP (Voges-Proskauera) obecność acetoiny – fermentacja z wytworzeniem 2,3-butanodiolu	zmiana zabarwienia podłoża do hodowli dodać: 0,6 ml 5% alkoholowego r-ru a-naftolu i 0,2 ml 40% KOH oraz kilka kropli 1% kreatyny, wstrząsnąć. W przypadku obecności acetoiny –po kilka minutach podłoża zmienia barwę na czerwoną
		Odczyn MR – określenie typu fermentacji: ú kwaśna ú obojętna	zmiana zabarwienia podłoża po dodaniu roztworu czerwieni metylowej - czerwone – świadczy o tym, że bakterie przeprowadzają fermentację kwaśną wytwarzając z cukrów kwasy np. mrówkowy, octowy, mlekowy, bursztynowy oraz alkohol etylowy. Wskutek tego odczyn hodowli spada poniżej pH 5. W tych warunkach znajdujący się w podłożu indykator – czerwień metylowa zmienia barwę podłoża na czerwoną - żółte – drobnoustroje fermentujące cukry z wytworzeniem produktów obojętnych nie powodują zmiany zabarwienia podłoża
Podłoże Singera	zawiesinę lub masę bakteryjną rozetrzeć na ściankach probówki tuż przy powierzchni do odczytu hodowlę bakterii rozdzielić do 2 probówek	Rozkład mocznika – obecność ureazy	zmiana zabarwienia podłoża na skutek alkalizacji podłoża przez amoniak, wydzielany podczas rozkładu mocznika, wskaźnik – czerwień fenolowa - zmienia barwę podłoża na czerwoną
		Wytwarznie indolu z tryptofanu – obecność tryptofanazy	po nakropleniu ok. 0,5 ml odczynnika Kovácsa na granicy faz powstaje czerwony pierścień
Podłoże z mannitolem	zawiesinę lub masę bakteryjną rozetrzeć na ściankach probówki tuż przy powierzchni	Rozkład mannitolu	zmiana zabarwienia podłoża
Podłoże z malonianem sodowym	zawiesinę lub masę bakteryjną rozetrzeć na ściankach probówki tuż przy powierzchni	Rozkład malonianu bakterie rozkładające malonian alkalizują podłoże	zmiana zabarwienia podłoża z zielonego niebieski o alkalizacji podłoża świadczy kolor niebieski (odczyn +) o zakwaszeniu – żółty
Podłoże z fenyloalaniną	posiew rysowy	Rozkład fenyloalaniny Na skutek tlenowej deaminacji fenyloalaniny powstaje kwas fenylopirogronowy	zmiana zabarwienia powierzchni skosu na kolor zielono-szmaragdowy po naniesieniu powierzchni skosu 0,3 ml FeCl3
Podłoże z 10% laktozą	zawiesinę lub masę bakteryjną rozetrzeć na ściankach probówki tuż przy powierzchni na powierzchnię podłoża nakroplić jałową parafinę	Rozkład laktozy w warunkach beztlenowych	zmiana zabarwienia podłoża z fioletowego na żółte

Ó Anna-Karina Kaczorowska

---

---